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分离纯化环状DNA（质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA和某些病毒DNA）的时候经常需要去除其中的线性DNA污染，而保留共价闭合环状DNA和带nick切口和gap缺口的环状DNA。本制品就是为满足此需求而开发。

• 即开即用，不需用户花费大量时间去摸索各种条件。
  
• 酶法去除线性DNA，专一性强，可以使线性DNA污染降级几个数量级，不会干扰后续试验。
  
• 不降解有nick和gap的环状DNA，包括质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA、环状病毒DNA。
  
• 处理不依赖于DNA序列，可降解任何线性DNA。而内切酶去除线性DNA则需要预先确知其在环状DNA上没有酶切位点。
  
• 得到的环状DNA可用于多种后续试验，尤其是WGA、PCR和测序等对污染敏感的试验。
  
• 本制品足够30μL体系使用50次。
  
• 本制品只能用于科研。

• 在干净塑料离心管中，按下表加入各成分（30μL体系）：
  

  成分	样品	阳性对照	阴性对照
  DNA（1～2μg）	自备样品DNA	自备环状DNA	自备线性DNA
  线性DNA清除剂溶液A	3μL
  线性DNA清除剂溶液B	1μL
  超纯水	至30μL

• 在PCR仪器上37℃保温16小时。如果使用水浴或者金属浴，则需要在管中加入200μL自备石蜡油以防止水分蒸发。
  
  • 保温时间过短可能会形成短的DNA片段，影响后续反应，所以最好保温16小时。
• 65℃加热10分钟灭活相关酶。
  
• 反应液可以直接用于后续的测序和PCR检测。如果需要纯化，则将30μL酶反应溶液转移到一个新的1.5mL离心管中，再加入60μL微量核酸沉淀剂。如果没有使用石蜡油，则直接在30μL酶反应溶液中加入60μL微量核酸沉淀剂。
  
  • 微量核酸沉淀剂有沉淀，取用前需要充分摇匀。
• 室温15000g离心10分钟。
  
• 弃上清后加自备的75%乙醇1mL，振荡混匀。
  
• 15000g离心3分钟，弃上清。
  
• 再短暂离心后小心吸弃上清，沉淀即为回收的去除掉线性DNA之后的DNA沉淀（含共价闭合环状DNA和带nick和gap的环状DNA），可溶于自备超纯水中后直接使用或放-20℃冰箱长期保存。